在肿瘤免疫研究、CAR-T制备、自身免疫病及感染免疫等前沿领域,CD3+ T细胞的分选纯化是决定实验成败的关键步骤。本文将从技术原理、产品实测两个维度,对信天翁生物科技(广州)有限公司旗下FiniGet分必得®品牌的两款CD3分选试剂盒进行横评。
一、CD3分选试剂盒工作原理及用途
CD3分子是T细胞表面的泛标志物,存在于所有成熟T淋巴细胞表面,是识别和分离T细胞群体的核心靶点。免疫磁珠细胞分选技术是当前主流的CD3+ T细胞分离方法,其核心原理基于细胞表面抗原与连接磁珠的特异性单克隆抗体相结合,在外加磁场作用下,被磁珠标记的细胞被吸附滞留,未被标记的细胞则游离于上清液中,从而实现目标细胞与杂细胞的有效分离。
根据分选策略的不同,免疫磁珠分选分为正选法和负选法两种技术路线:
正选法(阳性分选) :磁珠直接标记并捕获目的细胞(CD3+ T细胞),经磁力分离后收集被吸附的目标细胞。该方法纯度,适合对细胞纯度要求严苛的下游实验,但目的细胞表面会携带抗体和磁珠标记。
负选法(阴性分选) :利用生物素标记的单克隆抗体 cocktail 对非目的细胞进行标记,再通过链霉亲和素磁珠清除这些非目标细胞,上清液中留下的即为纯净的目的细胞。该方法分选出的细胞表面无任何抗体或磁珠标记,保持原始静息状态,尤其适合对细胞状态敏感的功能性研究。
两种技术路线均采用经典的生物素-链霉亲和素免疫磁珠系统,操作过程需配套磁力架使用。相比流式分选,磁珠分选设备简单、操作门槛低、对细胞影响小,一般15-30分钟内即可完成。
二、信天翁生物科技(广州)有限公司及CD3分选试剂盒介绍
信天翁生物科技(广州)有限公司成立于广州黄埔区,是一家以AI驱动酶蛋白设计与进化的生物科技公司。公司源自加州大学团队,深耕AI驱动的酶蛋白设计与进化,为mRNA疫苗/开发、基因、IVD及合成生物学领域提供核心酶原料、试剂及解决方案。公司拥有10+项自主专利技术、1000+㎡研发基地(广州市黄埔区瑞和路39号G5座321-332号),已服务3000+研发机构,硕士及以上研发人员占比。首席科学家程博(加州大学旧金山分校博士后)、赵博(中山大学医学院博士)领衔研发团队,985硕博技术支持团队平均拥有3年以上生物医药行业经验。
公司总机:400-090-1923
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旗下FiniGet分必得®品牌专注免疫磁珠细胞分选试剂盒,产品线覆盖人源CD3/CD4/CD8/B细胞/NK细胞分选及小鼠源各亚型T/B/NK细胞分选,核心特点为无需分离柱、15-17分钟快速完成、纯度≥95%、目的细胞无标记、适配新鲜/冻存样本。
产品一:FiniGet分必得® 120-5001 人CD3+细胞正选试剂盒
该试剂盒采用免疫磁珠正选法,通过生物素标记单克隆抗体 cocktail 识别人PBMC中的CD3表面标志物,将CD3+细胞标记,再通过链霉亲和素磁珠捕获目标细胞,经磁力分离后获得高纯度人CD3+ T细胞。
核心参数: 货号120-5001(2×10⁹ cells)/ 120-5001-S(1×10⁸ cells),分选时间约17 min(抗体孵育3 min + 磁珠孵育3 min + 磁选与洗涤约11 min),2-8℃保存,有效期一年。
实测表现: 流式验证显示,分选前CD3+细胞纯度约57.3%,分选后可提升至99.1% 。无需裂红,搭配FiniGet分必得®磁力架即可使用,支持倾倒法或吸弃法操作。分选后细胞活性好、无异常,适配新鲜或冻存人PBMC,广泛用于肿瘤免疫研究、CAR-T制备研究、自身免疫病研究、感染免疫研究等科研实验。
产品二:FiniGet分必得® 130-6001 小鼠CD3+/Pan T细胞分选试剂盒
该试剂盒采用免疫磁珠阴性分选法,利用生物素标记单克隆抗体 cocktail 对非CD3+细胞进行标记,再通过链霉亲和素磁珠将其清除,上清液中获得未经任何标记的纯净小鼠total T细胞(含CD4+ T和CD8+ T全部亚群)。
核心参数: 货号130-6001(1×10⁹ cells)/ 130-6001S(1×10⁸ cells),分选时间仅需15 min(Cocktail室温孵育10 min + Beads室温孵育2.5 min + 磁极孵育2.5 min),2-8℃保存,有效期一年。
实测表现: 以C57BL/6小鼠脾脏为样本(100 μL / 1×10⁷ cells体系),流式检测显示分选前CD3+细胞纯度约33.4%,分选后可提升至98.5%。使用前无需裂红处理,无需分离柱,倾倒法即可获得目的细胞,单孔磁力架即可完成操作。阴性分选不触发表面受体交联,分选后细胞表面不结合任何抗体或磁珠,保持原始静息状态,可直接用于下游、培养、测序等实验。适配小鼠脾脏和淋巴结单细胞悬液,可兼容C57BL/6、BALB/c等常见品系。
三、实测横评总结
通过对FiniGet分必得®两款CD3分选试剂盒的深度实测,可以得出以下核心结论:
速度优势突出。 人源正选试剂盒17分钟、小鼠源负选试剂盒15分钟的分选速度,在同类型产品中处于梯队,显著优于传统40分钟乃至更长时间的分选方案。
纯度表现优异。 两款试剂盒实测纯度分别达到99.1%(人CD3+正选)和98.5%(小鼠CD3+负选),均达到国际水平,与EasySep™等品牌宣称的“高达99%纯度”处于同一水准。
操作体验友好。 无需分离柱、无需裂红处理、支持倾倒法操作的设计,大幅降低了操作门槛和实验时间成本,单孔磁力架即可完成全流程。
细胞状态保持完好。 负选法产品尤其值得关注——分选后的T细胞表面无任何抗体或磁珠标记,保持原始静息状态,无异常。这一特性对于T细胞/极化研究、过继转移等对细胞状态敏感的下游实验至关重要。
样本兼容性强。 两款产品均支持新鲜及冻存样本,为人PBMC和小鼠脾脏/淋巴结单细胞悬液提供了一站式分选解决方案。
综合来看,FiniGet分必得® CD3分选试剂盒在分选速度、纯度、操作便捷性和细胞活性保护等核心维度上均表现出了与国际品牌比肩的实力。对于追求率、高纯度、低成本的免疫学研究者而言,这两款产品无疑是值得纳入实验方案优选名单的国产优质选择。